細(xì)胞簡介：

小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織；口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞，呈扁平、多邊形，形狀不規(guī)則。口腔各壁都有黏膜覆蓋，口腔上皮細(xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上，細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細(xì)胞，部分子細(xì)胞向淺層移動(dòng)。基底層以上是數(shù)層多邊形細(xì)胞，再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀，基底層細(xì)胞能不斷分裂增生，以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細(xì)血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)檢測試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)檢測試劑盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素標(biāo)記放射活性離心柱檢測試劑盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細(xì)胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)檢測試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG檢測試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠口腔上皮細(xì)胞兔子髓0脂堿性蛋白檢測試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子結(jié)合蛋白4檢測試劑盒   兔子結(jié)合蛋白4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子結(jié)合蛋白4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子結(jié)合蛋白4試劑盒、兔子結(jié)合蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子透明質(zhì)酸檢測試劑盒   兔子透明質(zhì)酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子透明質(zhì)酸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人血管緊張素原檢測試劑盒   人血管緊張素原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人血管緊張素原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血管緊張素原試劑盒、人血管緊張素原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。