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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細(xì)胞名稱  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一無(wú)精癥男性的外周血。2010年由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)通過(guò)EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1：

2傳代；5-6天一次  

傳代情況 P3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細(xì)胞，提供EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多轉(zhuǎn)化細(xì)胞。
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包裝：5 × 105次方（1ml）*皮膚肥大細(xì)胞

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包裝：5 × 105次方（1ml）*破骨細(xì)胞

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Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit*

Human costimulatory molecules recptor,CMR ELISA Kit*

Human cardiac troponin Ⅰ，cTn-ⅠELISA Kit進(jìn)口/原裝

Human Cardiac myosin-light chains 1,CMLC-1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

Human cardiac ankyrin repeat domain 1,ANKRD1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

Human cardiac isoform of Tropnin T,c ELISA Kit

Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISA Kit*

Human atrial natriuretic factor，ANF ELISA Kit進(jìn)口/原裝

Human Atrial Natriuretic Peptide，ANP ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

Human heart fatty acid binding protein，h-FABP ELISA Kit進(jìn)口/原裝

Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISA Kit進(jìn)口/原裝

Human Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit*

Human sex hormone-binding globulin,SHBG ELISA Kit*
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KMY1002保存Phospho-NFKBIB (Ser23)   磷酸化KB抑制蛋白β多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

phospho-NFKBIA(Tyr305)  磷酸化IKB alpha多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

phospho-NFKBIA(Ser32/36)  磷酸化IKB alpha(Ser32/36)多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKBIA (Tyr42)   磷酸化IKB α多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB2(Ser866+Ser870)  細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Thr932)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Ser933)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Ser907)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Ser903)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Ser893)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

Phospho-NFKB1(Ser338)  磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

phospho-NFKB p65(Thr505)  磷酸化細(xì)胞核因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*