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蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒操作原理及注意事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù):1279 更新時(shí)間:2017-10-27
蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒操作原理及注意事項(xiàng)
蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒是目前實(shí)驗(yàn)室zui常用的試劑盒之一,其主要原因是因?yàn)槭褂昧瞬僮髟砗唵危奖悖旖荩蟠蟮奶岣吡藢?shí)驗(yàn)效率。
ELISA試劑盒的操作方法zui常用的是雙抗夾心法,雙抗體夾心法原理主要是:固相載體上包被抗體,再加入待測抗原(可以是血清或者其它樣本),洗板(洗掉非特異性吸附),再加入酶標(biāo)抗體,再洗板(洗掉非特異性吸附),再加底物顯色。
在操作過程中有幾點(diǎn)需要注意:
①抗原是大分子抗原,具有2個(gè)以上的抗原表位;
②包被抗體和酶標(biāo)記的抗體都是針對抗原的特異性抗體,只不過它們分別針對的是不同抗原表位,經(jīng)常被稱作一抗和二抗;蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒
③酶是催化底物顯色的,起到一個(gè)信號放大作用。
ELISA試劑盒具體操作步驟如下:
1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4)蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標(biāo)本中抗原的量。
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